先導抗體分子發現服務

抗體藥以細胞、基因工程技術為主體的抗體工程技術進行制備，與靶抗原結合具有高特異性、有效性和安全性，臨床用于惡性腫瘤與自身免疫疾病等重大疾病，是發展迅速的生物制劑藥物，近年來成為新藥開發中主要的類別。

抗體藥的研發，從最初的確定靶點，到篩選先導分子，做臨床前研究，再到進入臨床1/2/3期試驗，以及完成最后的NDA申報，整個流程至少需要耗費10年的時間。在整個抗體藥物研發過程中，治療性抗體的發現是抗體藥物開發的最初階段，也是至關重要的。

華美生物18年來一直致力于蛋白質和抗體的研發和生產，并且已經成功地為多家制藥公司篩選了100多個治療性抗體候選物，其中許多已經進入了CMC或IND階段。對于一些具有挑戰性的靶點，包括CLDN18.2、CLDN6、CCR8、SSTR2、DLL3、LY6G6D、ROR1、SEMA4D、GPC3、CD16A等，我們不僅成功生產了抗原，還成功篩選出相應的重組抗體。

華美生物擁有5大蛋白表達系統，針對多次跨膜蛋白表達的三大技術平臺（VLPs、去垢劑、Nanodisc），針對小分子量蛋白表達的Nanoparticle平臺，已成功完成30多個針對多次跨膜蛋白的篩選服務項目。優秀的抗原制備技術平臺以及豐富的抗體篩選經驗，保證了華美生物可為您提供從目標到治療性抗體候選物的一站式解決方案，加快整個藥物開發進程。

服務流程

一、原材料準備

● 抗原制備

華美生物擁有18重組蛋白表達經驗，可提供從基因合成、載體構建到蛋白表達及純化的一站式服務。針對藥靶蛋白，在原有的五大重組蛋白表達系統（大腸桿菌、酵母、昆蟲細胞、哺乳動物細胞和無細胞蛋白表達系統）的基礎上，經過不斷探索與優化，華美生物現已推出四大優勢藥靶蛋白表達平臺，分別是病毒樣顆粒 (VLPs) 技術平臺、去垢劑技術平臺、Nanodisc技術平臺和Nanoparticle 表達平臺。

病毒樣顆粒 (VLPs) 技術平臺-跨膜蛋白

展示多次跨膜蛋白的天然構象，具有完整生物活性
可提高免疫原性，打破機體自身的免疫耐受
包膜VLPs中靶抗原豐度高于過表達細胞
大小為100-150nm，是噬菌體展示的最佳靶點
可用于免疫/ELISA/SPR/BLI，助力先導抗體發現

Nanodisc技術平臺-跨膜蛋白

近似于細胞膜環境，展示完整構象，保持生物活性
不含去垢劑，適用于對去垢劑有干擾的實驗
可直接用于噬菌體篩選（提供空nanodisc反篩）
可用于免疫/ELISA/SPR/BLI/細胞實驗

去垢劑技術平臺-跨膜蛋白

可全長表達多次跨膜蛋白，不僅僅只限于ECD表位
可精確定量，區別于VLPs和Nanodisc平臺
可應用于免疫/ELISA/SPR/BLI

Nanoparticle 表達平臺-小分子量蛋白

展示天然構象，具有完整生物活性
可增強免疫反應
可直接用于噬菌體篩選（提供空的Nanoparticle反篩）
可用于免疫/ELISA/SPR/BLI/細胞實驗

● 陽性抗體制備

陽性抗體又稱藥物對照抗體，通常用于檢測抗原或穩定細胞株，以確定抗原或穩定細胞株是否合格。此外，它還可作為篩選FACS（熒光激活細胞分選）抗體的對照。陽性抗體的優先順序如下：上市的抗體藥物，臨床階段（Ⅰ-Ⅲ）的抗體藥物，臨床前階段的抗體藥物，以及FACS抗體。

● 穩轉細胞株構建

穩轉細胞株是指通過穩定轉導持續穩定表達或干擾特定基因表達的細胞系。在抗體開發領域，穩轉細胞株可以作為免疫原刺激動物的特異性免疫反應，可針對多跨膜蛋白的靶點。此外，穩轉細胞株廣泛用于抗體結合和功能篩選實驗。華美生物可提供穩轉細胞株構建服務，具體服務內容如下：

序列	步驟	服務內容	周期
慢病毒包裝構建穩轉細胞服務
1	表達載體構建	密碼子優化、全基因合成、構建慢病毒表達載體，質粒大抽	2-3周
2	慢病毒包裝	將表達載體和輔助質粒共轉293T細胞，進行慢病毒包裝	1-2周
3	Cell pool篩選及驗證	用相應篩選劑篩選出陽性細胞，檢測cell pool表達量	1-2周
4	單克隆篩選及驗證	單細胞進行鋪板，并驗證單克隆表達量	3-4周
5	單克隆凍存及QC	單克隆擴大培養、凍存、復蘇檢測活率及微生物污染	1-2周
總時間			8-12周

CELL POOL檢測

單克隆篩選

二、小鼠免疫

SPF級別動物房

多種類型的小鼠

多種免疫方案

三、抗體篩選

華美生物具有十八年豐富雜交瘤單抗開發經驗，技術路線成熟，產品質量穩定可靠，高成功率。初步陽性率高達20%-40%左右，流式陽性率達到10%-20%左右，可滿足不同類型客戶需求。

四、質控（抗體功能檢測）

針對篩選獲取的先導分子抗體，華美生物會根據客戶需求進一步做抗體功能檢測，包括抗原ELISA、細胞FACS、抗原SPR及抗原binning檢測。抗原ELISA和抗原SPR主要檢測抗原抗體的結合活性與親和力，細胞FACS檢測抗體與細胞的結合活性，抗原binning檢測鑒定篩選的先導抗體分子和陽性抗體識別的抗原表位是否一致。