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TTR:淀粉樣變性關(guān)鍵蛋白,多款創(chuàng)新療法用于ATTR-CM和ATTR-PN罕見病!

日期:2022-04-15 09:54:07

2022年3月1日,全球領(lǐng)先制藥公司阿斯利康(AstraZeneca)旗下專注于罕見病領(lǐng)域的Alexion公司與Neurimmune Therapeutics就NI006達(dá)成7億美元合作。NI006是一款靶向轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(TTR)調(diào)節(jié)劑,正處于I期臨床試驗(yàn)階段,用于治療罕見病轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白淀粉樣變性心肌病(ATTR-CM)。同一天,Intellia Therapeutics和Regeneron Pharmaceutical公司公布了其體內(nèi)基因組編輯候選療法NTLA-2001的最新I期臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù),結(jié)果表明所有的給藥劑量都耐受良好,NTLA-2001所針對(duì)的疾病是轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白淀粉樣變性(ATTR),能將靶向TTR基因的CRISPR基因編輯系統(tǒng)遞送到人體內(nèi),特異性敲除TTR基因,降低TTR蛋白表達(dá),減少致病蛋白累積。TTR作為淀粉樣變性關(guān)鍵蛋白,已有多款上市藥物,與此同時(shí),越來(lái)越多基于TTR靶點(diǎn)的創(chuàng)新療法進(jìn)入臨床,為TTR相關(guān)的淀粉樣變性、神經(jīng)系統(tǒng)、代謝等疾病提供更多的診療方案!今天我們一起來(lái)了解下TTR。

1、什么是TTR?

轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(Transthyretin,TTR)也被稱為維生素A結(jié)合蛋白,是一種重要血漿蛋白組成成分,廣泛分布在多種細(xì)胞、血漿和組織液中 [1]。TTR作為一種載體蛋白,主要在肝臟和腦內(nèi)脈絡(luò)叢中合成,分泌到血液和腦脊液中,起著運(yùn)載甲狀腺素(主要是T4)和視黃醇(即維生素A)分布到全身各個(gè)組織和細(xì)胞中的作用 [2]。甲狀腺素對(duì)于人體生長(zhǎng)發(fā)育以及維持機(jī)體的重要功能都具有舉足輕重的意義 [3]。而維生素A的缺乏也是導(dǎo)致夜盲癥的主要原因 [4]。由此可見,TTR對(duì)于維持人體正常功能有著重要的意義。在生理環(huán)境下,TTR是一種穩(wěn)定的蛋白質(zhì)。TTR分解為單體后,可導(dǎo)致淀粉變性病 [5]。近年來(lái),大量研究表明TTR蛋白與感染,炎癥,營(yíng)養(yǎng)不良,淀粉樣變性以及腫瘤相關(guān) [6],尤其是針對(duì)TTR淀粉樣變性病治療,已有多種TTR特異性藥物研發(fā)批準(zhǔn)上市 [7, 8]。同時(shí),越來(lái)越多的TTR靶向藥物正逐步走向臨床,用于神經(jīng)系統(tǒng)疾病、內(nèi)分泌與代謝疾病等等。

2、什么是TTR淀粉樣變性?

首先我們了解下,什么是淀粉樣變性(Amyloidosis)?淀粉樣變性是一類異常折疊蛋白質(zhì)在組織中積聚引起的疾病,引起的病癥表現(xiàn)取決于淀粉樣蛋白積累的部位,病變主要發(fā)生在腎臟、心臟以及神經(jīng)系統(tǒng)等器官。那什么是TTR淀粉樣變性?簡(jiǎn)言之,TTR其突變體的淀粉樣沉積,可引發(fā)的TTR淀粉樣變性 [9]

具體而言,TTR是一種具有高度穩(wěn)定性的四聚體結(jié)構(gòu)蛋白,但TTR四聚體在病理情況或非正常生理狀態(tài)下(如應(yīng)激、炎癥反應(yīng)時(shí))可發(fā)生分解,降解為單體。TTR的單體會(huì)生成種類復(fù)雜多樣的淀粉樣纖維,從而導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)淀粉樣纖維非正常生理性集聚。而細(xì)胞內(nèi)的淀粉樣異常沉積會(huì)造成細(xì)胞本身新陳代謝異常以至整個(gè)組織功能上的改變和紊亂,從而引發(fā)相關(guān)的疾病,比如報(bào)道較多的,遺傳性轉(zhuǎn)甲狀腺素淀粉樣變性病 [10]圖1)。

TTR淀粉樣變性級(jí)聯(lián)反應(yīng)

圖1. TTR淀粉樣變性級(jí)聯(lián)反應(yīng)

3、TTR的合成與代謝途徑

在人體內(nèi)中,血漿中90%的TTR都是由肝臟和脈絡(luò)叢合成分泌。胎兒TTR可能有雙重來(lái)源,一部分遺傳自母體,其余部分由胎兒自身肝臟合成。除了肝臟和脈絡(luò)叢,TTR還能夠在視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞、胰島細(xì)胞、內(nèi)臟卵黃膜內(nèi)胚層、松果腺、人胚胎滋養(yǎng)層等細(xì)胞中合成 [11, 12]

盡管TTR的合成分泌已經(jīng)進(jìn)行了很深入的研究,但是它的分解代謝并未完全研究清楚。有研究發(fā)現(xiàn),TTR的代謝主要集中在肝臟(36-38%),肌肉(12-15%)和皮膚(8-10%) [13]。進(jìn)一步的數(shù)據(jù)表明,TTR在肝臟和腎臟的內(nèi)化是受體介導(dǎo)的。其中,腎臟攝入TTR是經(jīng)Megalin(也被稱為低密度脂蛋白相關(guān)蛋白 2)介導(dǎo)。Megalin屬于低密度脂蛋白(LDL)受體家族成員,一種跨膜受體蛋白,也是廣泛存在于機(jī)體內(nèi)的多功能內(nèi)吞受體,主要表達(dá)于腎小管近端上皮。而肝臟攝入TTR是由對(duì)受體相關(guān)蛋白敏感的LDL家族受體成員介導(dǎo)。通過影響受體相關(guān)蛋白或可抑制肝臟對(duì)TTR的攝入,這表明TTR與蛋白代謝過程存在共同的途徑。鑒于Megalin不在肝臟中表達(dá),因此,需要進(jìn)一步的研究來(lái)闡明TTR在肝臟中如何進(jìn)行代謝作用 [14] 圖2)。

TTR的代謝途徑

圖2. TTR的代謝途徑

4、TTR在淀粉樣變性病、代謝疾病以及腫瘤中的作用

TTR作為人類生命活動(dòng)的基本物質(zhì),TTR生理功能遠(yuǎn)遠(yuǎn)不只是轉(zhuǎn)運(yùn)甲狀腺素和視黃醇。特定位置的TTR分別具有特定的生理效應(yīng)。在TTR相關(guān)疾病的研究中,研究最多的是TTR相關(guān)淀粉樣變性病,如轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白淀粉樣變性心肌病(Transthyretin Cardiac Amyloidosis Myocardiopathy,ATTR-CM) [15]、轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白淀粉樣變性多發(fā)性神經(jīng)病(Transthyretin Amyloid Polyneuropathy,ATTR-PN) [16],以及阿爾茲海默癥(Alzheimer's Disease,AD) [17]。TTR還與多種代謝疾病相關(guān),如II型糖尿病和糖調(diào)節(jié)受損 [18]。TTR與腫瘤也有相關(guān)報(bào)道,其在不同的腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)水平存在明顯差異,可能參與促進(jìn)或抑制惡性腫瘤的過程 [19, 20]

4.1 TTR相關(guān)的淀粉樣變性病

如前所述,TTR基因突變能導(dǎo)致可遺傳的家族性淀粉樣變性病(如ATTR-CM和ATTR-PN)。ATTR-CM是一種罕見的心肌病,主要是由于TTR基因突變,引起TTR蛋白異常解聚形成異常物質(zhì)(淀粉樣物質(zhì))沉積于心臟,表現(xiàn)為限制性心肌病和進(jìn)行性心力衰竭 [21]。ATTR-PN是一種遺傳性的罕見致死性神經(jīng)退行性疾病,系TTR基因變異致周圍神經(jīng)和多器官系統(tǒng)受累的常染色體顯性遺傳性疾病,其臨床主要表現(xiàn)為四肢遠(yuǎn)端對(duì)稱性感覺障礙,如麻木、疼痛、肌無(wú)力和肌萎縮等等 [22]。目前,ATTR-CM和ATTR-PN的治療方法主要是抑制突變型TTR基因mRNA的產(chǎn)生或穩(wěn)定TTR蛋白四聚體的結(jié)構(gòu)。

除了遺傳性的淀粉樣病變,另外,與TTR研究較多的疾病是阿爾茲海默癥(Alzheimer’s disease,AD),AD是一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)變性病,淀粉樣蛋白的粘性斑塊是AD的標(biāo)志。有研究發(fā)現(xiàn),當(dāng)TTR表達(dá)上升時(shí),AD癥狀發(fā)展較慢 [17]。另有報(bào)道顯示,TTR遺傳突變或能作為阿爾茲海默病的風(fēng)險(xiǎn)基因 [23]。因此,TTR可能在AD中既有保護(hù)作用又有危害。

4.2 TTR相關(guān)的代謝疾病

TTR作為一種常規(guī)的生化檢測(cè)指標(biāo),長(zhǎng)期以來(lái)TTR都被視為評(píng)價(jià)機(jī)體營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)的敏感臨床指標(biāo)。多項(xiàng)研究表明,糖尿病患者體內(nèi)TTR水平與其并發(fā)癥及預(yù)后密切相關(guān)。此外,血漿高TTR水平與II型糖尿病和糖調(diào)節(jié)受損患病風(fēng)險(xiǎn)增加存在顯著的正關(guān)聯(lián)關(guān)系。TTR能結(jié)合視黃醇轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白形成大分子化合物,以降低視黃醇結(jié)合蛋白的腎臟濾過率,維持血漿視黃醇結(jié)合蛋白濃度,而視黃醇結(jié)合蛋白作為一種明確的脂肪因子,與糖尿病發(fā)生發(fā)展有著密不可分的關(guān)系 [18, 24, 25]。這些研究為TTR作為代謝患病風(fēng)險(xiǎn)潛在的生物標(biāo)志物提供了理論基礎(chǔ)。

4.3 TTR相關(guān)的腫瘤疾病

多項(xiàng)研究表明,TTR在多種腫瘤患者血漿中和腫瘤細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)存在異常,包括胰腺癌 [26]、肺癌 [27]、肝癌 [28]、卵巢癌 [29]、結(jié)直腸癌 [30]。比如,在肝癌細(xì)胞中,TTR基因存在缺失,在體外轉(zhuǎn)染肝癌細(xì)胞后可抑制其生長(zhǎng)。而有實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)TTR在胰腺導(dǎo)管癌中的表達(dá)水平上調(diào),并且TTR在肺癌、卵巢癌及結(jié)直腸癌等其他腫瘤中的表達(dá)也存在差異性,提示TTR可能在不同腫瘤中起雙重作用 [28-30]。現(xiàn)在多數(shù)研究認(rèn)為,作為腫瘤中異于正常表達(dá)的蛋白之一,TTR是一種敏感度和特異性均較好的新的腫瘤標(biāo)志物,在臨床應(yīng)用中具有潛在的價(jià)值和廣闊的空間。

5、TTR的臨床研究進(jìn)展

目前,已有數(shù)種研發(fā)上市的TTR靶向藥物,主要為TTR抑制劑和TTR穩(wěn)定劑,用于TTR淀粉樣變性病治療。TTR抑制劑通過抑制TTR基因和運(yùn)甲狀腺素蛋白,從而防止淀粉樣蛋白沉積,進(jìn)而治療淀粉樣變性病。TTR穩(wěn)定劑通過在甲狀腺素結(jié)合位點(diǎn)與TTR選擇性地結(jié)合,穩(wěn)定化合物并減緩解離成單體,對(duì)TTR淀粉樣蛋白形成限速,提高TTR結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性。

來(lái)自PharmSanp的數(shù)據(jù)庫(kù)顯示(表1),已上市的TTR的穩(wěn)定劑包括:輝瑞公司的他法米迪(tafamidis)。此外,BridgeBio Pharma子公司Eidos Therapeutics有一種新研發(fā)的四聚體穩(wěn)定劑acoramidis(AG-10、BBP-265)具有良好的耐受性和安全性,正在進(jìn)行Ⅲ期臨床試驗(yàn)。已上市的TTR抑制劑包括:有Ionis Pharmaceuticals公司的伊諾特生(Inotersen Sodium)、Alnylam Pharmaceuticals公司的帕替司蘭(Patisiran Sodium)。除了TTR抑制劑和TTR穩(wěn)定劑,更多的靶向TTR創(chuàng)新藥物進(jìn)入臨床,如NI-006蛋白質(zhì)折疊調(diào)節(jié)劑,為一款在研人源化單克隆抗體,正處于I期臨床,用于心肌疾病、TTR淀粉樣變性病、家族性淀粉樣神經(jīng)病。綜合國(guó)內(nèi)外的文獻(xiàn),TTR還對(duì)多種代謝和惡性腫瘤的早期預(yù)測(cè)具有價(jià)值。因此,未來(lái)進(jìn)一步的開展TTR對(duì)于臨床疾病淀粉樣變性、代謝、以及腫瘤的研究,將具有巨大的重大意義。

藥物 靶點(diǎn) 作用機(jī)制 藥物類型 適應(yīng)癥 在研機(jī)構(gòu) 最高研發(fā)狀態(tài)
Patisiran Sodium TTR;RNA RNA干擾 siRNA 神經(jīng)系統(tǒng)疾病;
先天性遺傳性新生兒疾病和畸形;
內(nèi)分泌與代謝疾病
Alnylam Pharmaceuticals, Inc. 批準(zhǔn)上市
INOTERSEN SODIUM TTR RNA干擾;TTR抑制劑 反義寡核苷酸 心血管疾病;
消化系統(tǒng)疾病;
神經(jīng)系統(tǒng)疾病
IONIS PHARMACEUTICALS,INC.;
Akcea Therapeutics, Inc.
批準(zhǔn)上市
Tafamidis Meglumine TTR TTR穩(wěn)定劑 小分子化藥 神經(jīng)系統(tǒng)疾病;
心血管疾病;
先天性遺傳性新生兒疾病和畸形
Pfizer Europe MA EEIG;
FoldRx Pharmaceuticals, Inc.;
Pfizer Inc.
批準(zhǔn)上市
Vutrisiran TTR RNA干擾;TTR抑制劑 siRNA 先天性遺傳性新生兒疾病和畸形;
內(nèi)分泌與代謝疾病;
其他疾病
Alnylam Pharmaceuticals, Inc. 申請(qǐng)上市
Eplontersen SAA1;TTR SAA抑制劑;TTR抑制劑 反義寡核苷酸 內(nèi)分泌與代謝疾病;
神經(jīng)系統(tǒng)疾病
IONIS PHARMACEUTICALS,INC.;
Akcea Therapeutics, Inc.
臨床3期
Acoramidis TTR TTR調(diào)節(jié)劑 小分子化藥 神經(jīng)系統(tǒng)疾病;
心血管疾病;
內(nèi)分泌與代謝疾病
Eidos Therapeutics;
Alexion Pharmaceuticals, Inc.
臨床3期
NI-006 TTR 蛋白質(zhì)折疊調(diào)節(jié)劑 單克隆抗體 心血管疾病;
神經(jīng)系統(tǒng)疾病
Neurimmune Therapeutics;
Alexion Pharmaceuticals, Inc.
臨床1期
PRX-004 TTR TTR調(diào)節(jié)劑 生物藥 其他疾病 Prothena Corp. Plc;
Novo Nordisk
臨床1期

表1:靶向TTR在研藥物

為鼎力協(xié)助各藥企針對(duì)TTR靶點(diǎn)在淀粉樣變性、代謝、以及腫瘤等疾病藥物方面的研發(fā)工作,CUSABIO推出TTR活性蛋白產(chǎn)品(Code: CSB-MP025270HUh6;Code: CSB-MP025270MO),助力您在TTR機(jī)制方面的研究或其潛在臨床價(jià)值的探索。

Recombinant Human Transthyretin (TTR) (Active)

High Purity Validated by Western Blot (WB)

Purity was greater than 90% as determined by SDS-PAGE. (Tris-Glycine gel) Discontinuous SDS-PAGE (reduced) with 5% enrichment gel and 15% separation gel.

Excellent Bioactivity Validated by Functional ELISA

Immobilized RBP4 (CSB-MP019483HU) at 5 μg/ml can bind human TTR, the EC50 of human TTR protein is 284.7-391.7 ng/ml.

Recombinant Mouse Transthyretin (TTR) (Active)

High Purity Validated by Western Blot (WB)

Purity was greater than 95% as determined by SDS-PAGE. (Tris-Glycine gel) Discontinuous SDS-PAGE (reduced) with 5% enrichment gel and 15% separation gel.

Excellent Bioactivity Validated by Functional ELISA

Immobilized Mouse Ttr at 5 μg/ml can bind Mouse Rbp4 (CSB-MP4018MO), the EC50 is 17.06-26.23 ng/mL.

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