怎么提高重組抗體的表達量?
日期:2025-05-15 13:39:00
優化表達載體:合理設計載體元件,如選擇強啟動子(如 CMV、EF1α )增強基因轉錄,添加有效的終止子保證轉錄終止;優化 5’和 3’非翻譯區(UTR),提高 mRNA 的穩定性和翻譯效率;引入增強子元件,提升基因表達水平。
選擇合適的宿主細胞:根據抗體特性和生產需求,篩選高表達、遺傳穩定的宿主細胞株。例如,經過馴化的 CHO 細胞系更適應無血清培養,能提高表達量和生產效率。

優化培養條件:調整培養基成分,補充合適的氨基酸、維生素和微量元素;控制培養溫度、pH 值、溶氧量等參數,例如降低培養溫度可減緩細胞代謝速度,延長細胞存活時間,促進蛋白質正確折疊和表達;采用分批補料或連續灌流培養模式,及時補充營養物質,去除代謝廢物,維持細胞活性和高表達狀態。
蛋白質折疊與分泌輔助:共表達分子伴侶和折疊酶,幫助抗體正確折疊,減少錯誤折疊和聚集;對信號肽進行優化,增強抗體的分泌效率,使其更順利地從細胞內轉運到細胞外。
上一篇: 重組抗體表達技術面臨哪些挑戰?