熒光定量pcr試劑盒原理
日期：2023-11-24 14:02:50
熒光定量PCR（Polymerase Chain Reaction）試劑盒是一種用于測定DNA或RNA樣本中特定序列的數量的試劑盒。其原理如下：
? DNA擴增：首先，將待測樣本中的DNA通過PCR技術進行擴增。PCR是一種體外的DNA復制過程，利用DNA聚合酶酶作用下的溫度循環，使DNA序列得以快速擴增。
? 靶標序列擴增：PCR反應中使用引物（primers）選擇性地識別和結合目標DNA序列的兩個端部，形成DNA復制的起始點。在PCR循環中，引物會被DNA聚合酶酶作用下延伸，產生兩條新的DNA鏈。
? 熒光探針檢測：在熒光定量PCR中，引物和熒光探針（probe）同時使用。熒光探針通常由一個與目標序列互補的DNA片段和一個與熒光染料結合的短鏈上的熒光基團組成。
? 信號累積：當PCR反應進行時，DNA聚合酶會沿著DNA模板鏈進行擴增，并在到達熒光探針的位置時，酶會切開熒光探針，釋放熒光染料。因此，隨著PCR的進行，熒光信號會不斷增加。
? 熒光檢測與定量：熒光信號可通過特定的熒光檢測系統進行實時監測。檢測系統會記錄PCR反應過程中的熒光信號強度，并通過內部標準曲線等方法，將信號轉化為目標序列的數量。
? 通過以上步驟，熒光定量PCR試劑盒可以快速、準確地測定樣本中特定DNA或RNA序列的數量，廣泛應用于基因表達分析、病原體檢測、基因突變分析等領域。
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