elisa試劑盒各試劑作用區(qū)別
日期：2023-09-25 15:35:47
ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）是常用的生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)，用于檢測(cè)和定量分析特定抗原或抗體的存在。ELISA試劑盒通常包含以下主要試劑：
1、涂布抗原
? 涂布抗原是一種包含目標(biāo)抗原的溶液或片段。它負(fù)責(zé)在固相載體上固定目標(biāo)抗原，使其與待測(cè)樣品中的特異性抗體發(fā)生結(jié)合反應(yīng)。
2、樣品/標(biāo)準(zhǔn)
? 樣品是待測(cè)的生物樣本，可以是血清、血漿、組織提取物等。而標(biāo)準(zhǔn)則是已知濃度的目標(biāo)抗原。
? 它們用于檢測(cè)和量化目標(biāo)抗原的存在和水平，與涂布抗原進(jìn)行結(jié)合反應(yīng)。
3、初級(jí)抗體
? 初級(jí)抗體是針對(duì)目標(biāo)抗原的特異性抗體。它與樣品中的目標(biāo)抗原結(jié)合形成免疫復(fù)合物。
? 初級(jí)抗體通常與輔助設(shè)備（如酶、熒光標(biāo)記或生物素）結(jié)合，以便在后續(xù)步驟中檢測(cè)和定量。
4、洗滌緩沖液
? 洗滌緩沖液用于清洗試驗(yàn)孔，去除未結(jié)合的物質(zhì)（如非特異性結(jié)合物）。
? 它可以包含適當(dāng)?shù)柠}、洗滌劑和緩沖劑，以保持試驗(yàn)環(huán)境的穩(wěn)定。
5、二級(jí)抗體
? 二級(jí)抗體是與初級(jí)抗體結(jié)合并攜帶標(biāo)記（如酶、熒光或生物素）的抗體。
? 它與初級(jí)抗體結(jié)合免疫復(fù)合物，進(jìn)一步增強(qiáng)信號(hào)產(chǎn)生和檢測(cè)效果。
6、底物
? 底物是一種通過(guò)酶促反應(yīng)觸發(fā)可見(jiàn)信號(hào)的化學(xué)物質(zhì)。常見(jiàn)的底物包括酶標(biāo)記的底物（如TMB、ABTS等）和熒光底物。
? 底物與酶結(jié)合時(shí)會(huì)發(fā)生顏色變化或熒光發(fā)射，用于定量或檢測(cè)信號(hào)。
7、停止液
? 停止液是一種改變反應(yīng)pH值的溶液，用于停止底物反應(yīng)，阻止進(jìn)一步的信號(hào)產(chǎn)生。
它通常加入后會(huì)使顏色或熒光信號(hào)停止變化，并穩(wěn)定所測(cè)得的信號(hào)。
? ELISA試劑盒中的每個(gè)試劑在特定步驟中起到關(guān)鍵作用，用于實(shí)現(xiàn)抗原-抗體反應(yīng)、清洗、信號(hào)生成和停止等過(guò)程，最終得到可靠的結(jié)果。具體的試劑和使用方法可能會(huì)因供應(yīng)商和實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩兴煌?，因此在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)仔細(xì)閱讀和遵循試劑盒說(shuō)明書(shū)的操作指南。
