tricine膠中夾層膠的作用
日期：2023-06-20 16:23:23
在蛋白質(zhì)電泳分離中，tricine SDS-PAGE技術(shù)是一種常用的方法，其膠體系包括膠上液體、膠下液體和夾層膠。夾層膠是指位于兩層SDS膠液層之間的一層特殊膠液，其主要作用是調(diào)控樣品走形、改善分辨率，提高蛋白質(zhì)電泳分離的準(zhǔn)確度和靈敏度。
夾層膠通常由三種化學(xué)物質(zhì)組成：tricine、bis-tris和檸檬酸。tricine是一種緩沖劑，可保持膠環(huán)境的穩(wěn)定性，使分離的蛋白質(zhì)能得到有效的緩沖作用；bis-tris是一種弱酸基緩沖劑，在酸性pH下具有良好的緩沖效果，可以維持膠的穩(wěn)定性；檸檬酸是一種類(lèi)似EDTA的絡(luò)合劑，可以與金屬離子配對(duì)并穩(wěn)定樣品，避免樣品降解。
夾層膠的作用主要有以下幾點(diǎn)：
1、調(diào)整樣品走形
使用夾層膠可以協(xié)助樣品保持在SDS膠液層之間，防止樣品產(chǎn)生偏移或“漂移”現(xiàn)象，從而使分離的蛋白質(zhì)能夠更準(zhǔn)確、均勻地沉淀在SDS膠液層中。這種方法可使樣品與附近的蛋白質(zhì)分離開(kāi)來(lái)，使電泳分離更加精確。
2、改善分辨率
夾層膠可以縮小樣品帶的寬度，減少帶之間的重疊和混疊，提高分辨率和檢測(cè)效果。樣品與較大的蛋白質(zhì)分子相結(jié)合時(shí)，它們可能會(huì)難以分離，并且可能需要更長(zhǎng)時(shí)間來(lái)達(dá)到完全分離。夾層膠可以增加分離樣品的長(zhǎng)度，導(dǎo)致更好的分離，同時(shí)還可減少較大蛋白質(zhì)與載體蛋白質(zhì)之間的交錯(cuò)。
3、提高靈敏度
使用夾層膠可以增強(qiáng)少量樣品的分離效果，提高電泳分離的靈敏度。其緩沖劑和絡(luò)合劑成分可優(yōu)化樣品的條件，從而使分離效果更加優(yōu)良，進(jìn)一步加強(qiáng)對(duì)低濃度蛋白的檢測(cè)。
夾層膠在tricine SDS-PAGE技術(shù)中具有非常重要的作用，它可以調(diào)整樣品走形、改善分辨率、提高靈敏度等，這有助于提高蛋白質(zhì)電泳分離的準(zhǔn)確度和靈敏度，為后續(xù)的蛋白質(zhì)分析工作提供了良好的基礎(chǔ)。
