常見的抗體標(biāo)記方法有哪些？各有什么特點(diǎn)？
日期：2025-06-04 14:52:56
1、熒光標(biāo)記：
特點(diǎn)：具有高靈敏度和直觀性，可通過熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀等設(shè)備進(jìn)行檢測，還能實(shí)現(xiàn)多重標(biāo)記（使用不同顏色的熒光染料）。
常用染料：FITC（綠色）、Cy3/Cy5（紅色 / 遠(yuǎn)紅外）、Alexa Fluor 488/647 等。
應(yīng)用場景：適用于細(xì)胞成像、流式細(xì)胞術(shù)以及熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）實(shí)驗(yàn)。
2、酶標(biāo)記：
特點(diǎn)：通過酶催化底物顯色（如 DAB 顯色呈棕色），可進(jìn)行定性或半定量檢測，成本較低，但需要注意底物的穩(wěn)定性。
常用酶：辣根過氧化物酶（HRP）、堿性磷酸酶（AP）。
應(yīng)用場景：主要用于 ELISA、Western blot 和免疫組化（IHC）。
3、生物素標(biāo)記：
特點(diǎn)：生物素與鏈霉親和素具有極高的親和力（Kd≈10?¹? M），可用于信號放大，例如在 ELISA 中構(gòu)建 “生物素 - 親和素” 體系。
應(yīng)用場景：適用于多重檢測、芯片技術(shù)以及磁珠分離等領(lǐng)域。
4、同位素標(biāo)記：
特點(diǎn)：具有極高的靈敏度（可檢測到皮克級水平），但存在放射性安全問題，且需要專業(yè)設(shè)備（如 γ 計(jì)數(shù)器）。
常用同位素：¹²?I、³H。
應(yīng)用場景：主要用于放射免疫分析（RIA）和受體結(jié)合實(shí)驗(yàn)。
5、納米顆粒標(biāo)記：
特點(diǎn)：金納米顆粒標(biāo)記的抗體可通過電子顯微鏡觀察（呈現(xiàn)電子致密顆粒），在免疫電鏡中較為常用；磁性納米顆粒則可用于細(xì)胞分選或磁靶向治療。
