捕獲抗體和檢測抗體的區(qū)別
日期:2023-12-05 15:06:23
捕獲抗體(Capture Antibody)和檢測抗體(Detection Antibody)是免疫分析技術(shù)中常用的兩種抗體,它們在雙抗體夾心ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,酶聯(lián)免疫吸附試驗)等實驗中扮演著關(guān)鍵角色。這兩種抗體通常針對同一靶標(biāo)分子的不同表位(epitope),以確保它們可以同時結(jié)合到靶標(biāo)分子上而不會相互干擾。

? 捕獲抗體: 捕獲抗體主要作用是固定化靶標(biāo)分子,即將待檢測的抗原(antigen)“捕獲”在固相載體(如微孔板)上。捕獲抗體通常是先被涂布在ELISA板的微孔中,然后添加樣本,含有目標(biāo)抗原的樣本與捕獲抗體結(jié)合,通過洗滌去除未結(jié)合的成分。
? 檢測抗體: 檢測抗體的作用是識別并結(jié)合到已經(jīng)被捕獲的抗原上,用于檢測和量化抗原。檢測抗體通常是在抗原與捕獲抗體結(jié)合后加入的,它可以直接標(biāo)記有酶或者其他可以產(chǎn)生信號的標(biāo)簽,也可以是次級抗體,需要通過進一步添加帶有酶標(biāo)記的三級抗體來產(chǎn)生可檢測的信號。
? 在雙抗體夾心ELISA實驗中,捕獲抗體和檢測抗體的協(xié)同作用使得實驗?zāi)軌蛱禺愋缘貦z測并量化樣本中的目標(biāo)抗原。捕獲抗體首先固定化抗原,然后檢測抗體通過其標(biāo)記產(chǎn)生的信號來反映抗原的存在和/或數(shù)量。
? 捕獲抗體和檢測抗體的區(qū)別主要在于它們在實驗中的作用和位置,捕獲抗體用于固定抗原,而檢測抗體用于通過其標(biāo)記產(chǎn)生信號,從而實現(xiàn)對抗原的檢測和量化。在選擇抗體時,為了避免交叉反應(yīng),通常需要確保這兩種抗體針對的是抗原的不同表位,并且彼此不會相互干擾。
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