雜交瘤技術制備單克隆抗體的主要過程
日期：2023-09-21 13:14:07
制備單克隆抗體的主要過程是通過雜交瘤技術實現(xiàn)的。以下是其主要步驟：
免疫原注射：將目標抗原注射到小鼠等動物的體內(nèi)，激活其免疫系統(tǒng)產(chǎn)生特異性抗體。
細胞融合：提取免疫動物的B細胞（產(chǎn)生抗體的細胞）和骨髓瘤細胞（不斷分裂的癌細胞），進行細胞融合。
雜交瘤篩選：將融合細胞培養(yǎng)在含有選擇性培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，使只有雜交瘤能夠存活，而其他細胞死亡。
篩選單克隆細胞：通過稀釋法將雜交瘤細胞進行分離培養(yǎng)，使每個細胞單獨分裂形成單個細胞克隆，最終獲得單克隆細胞。
驗證單克隆性：對每個單克隆細胞進行酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）等方法驗證其產(chǎn)生的抗體特異性和單一性。
擴大培養(yǎng)：將驗證為單克隆的細胞進行擴大培養(yǎng)，以大量產(chǎn)生抗體。
純化抗體：通過柱層析等方法對培養(yǎng)上清液進行純化，獲得單克隆抗體。
制備單克隆抗體的過程中，雜交瘤技術的關鍵在于融合免疫動物的B細胞和骨髓瘤細胞，從而實現(xiàn)長期穩(wěn)定地大量產(chǎn)生特異性抗體的單克隆細胞。這種技術的應用廣泛，可以用于生物醫(yī)學研究、藥物研發(fā)、疾病診斷等領域。
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