陽離子填料純化抗體檢測(cè)方法?
日期：2023-07-12 13:51:59
陽離子填料是一種常用于蛋白質(zhì)純化過程中的材料，可以通過吸附和洗脫的方式來純化目標(biāo)蛋白質(zhì)。下面是一種使用陽離子填料純化抗體的方法：
樣品制備：首先，將含有抗體的樣品加入適當(dāng)?shù)木彌_液中，以維持適宜的pH和離子強(qiáng)度。
填料平衡：將陽離子填料溶懸液加入純化柱中，并使用緩沖液進(jìn)行填充劑平衡，以確保填充劑與緩沖液之間的交互作用。
樣品加載：將樣品溶液緩慢地加入填充劑平衡好的純化柱中，讓抗體與填料表面的正電荷相互作用，并發(fā)生吸附。
洗脫：使用適當(dāng)?shù)南疵摼彌_液，可以通過改變pH、離子強(qiáng)度或洗脫劑濃度等條件，去除非特異性吸附的雜質(zhì)蛋白質(zhì)。洗脫后，目標(biāo)抗體會(huì)被徹底洗脫出來。
重生成：為了再次使用填充劑，可以使用一系列的重生成步驟來去除吸附在填充劑表面的殘留雜質(zhì)和去離子緩沖液。
最終純化：通過收集洗脫液中富集的抗體，可以得到高純度的抗體。
該方法僅僅是一種常見的純化步驟之一，具體的純化方案還需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求和樣品特性進(jìn)行優(yōu)化和調(diào)整。
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