體液免疫功能的檢測(cè)

日期：2010-07-30 14:55:56

一、補(bǔ)體測(cè)定

1、血清總補(bǔ)體活性測(cè)定

當(dāng)兔抗羊紅細(xì)胞血清與羊紅細(xì)胞結(jié)合后，遇到補(bǔ)體即可使羊紅細(xì)胞發(fā)生溶血，依據(jù)這一特點(diǎn)可建立測(cè)定血清中總補(bǔ)體活性的方法。

當(dāng)血清的效價(jià)和綿羊紅細(xì)胞濃度保持一定的情況下，在規(guī)定的反應(yīng)溫度和時(shí)間內(nèi)，溶血程度與補(bǔ)體量呈正相關(guān)。因此，通過(guò)測(cè)定溶血程度，即可測(cè)知補(bǔ)體的含量。目前常用的方法是用 50%補(bǔ)體溶血試驗(yàn)（CH30）測(cè)定總補(bǔ)體活性，即求出使50％致敏羊紅細(xì)胞發(fā)生溶血時(shí)的血清最小用量。以CH50單位/ml表示。

2、補(bǔ)體旁路途徑活性測(cè)定

用于人和動(dòng)物血清補(bǔ)體旁路途徑活性的測(cè)定，其依據(jù)是未致敏的家兔紅細(xì)胞可以激活B因子，引起補(bǔ)體旁路途徑活化，導(dǎo)致兔紅細(xì)胞溶解。此法是將一定濃度和容積的新鮮家兔紅細(xì)胞懸液與不同量的待檢血清混合，作用一定時(shí)間后觀察溶血反應(yīng)。根據(jù)引起50％溶血所需的最小補(bǔ)體量，計(jì)算出待檢血清補(bǔ)體旁路途徑的活性，以ACH50單位/ml表示。

3、補(bǔ)體組分測(cè)定

目前已能對(duì)所有的補(bǔ)體組分進(jìn)行提純、鑒定和制備相應(yīng)的特異性抗體，并對(duì)多種補(bǔ)體組分及其裂解產(chǎn)物進(jìn)行定量測(cè)定。常用的方法是單向免疫擴(kuò)散（SRID）或火箭電泳法。現(xiàn)已建立更為靈敏、快速的免疫比濁法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）及放射免疫測(cè)定（RIA）等方法。

二、免疫球蛋白測(cè)定

1、用已知抗原檢測(cè)相應(yīng)抗體，如各種感染性疾病的輔助診斷和流行病學(xué)調(diào)查等。

2、通過(guò)免疫動(dòng)物或單克隆抗體技術(shù)制備特異抗體，對(duì)Ig進(jìn)行定性或定量測(cè)定，以及用于與Ig異常的有關(guān)疾病的診斷，如免疫缺陷或免疫增生病。

三、免疫復(fù)合物檢測(cè)

1、組織內(nèi)的IC檢查

對(duì)于組織中沉積的IC的檢查，常用的方法是將待檢組織切片以熒光素、酶或全溶膠標(biāo)記的抗體進(jìn)行免疫組化染色后鏡檢。通常是用標(biāo)記的抗球蛋白抗體或抗C3抗體檢查IC中的Ig或補(bǔ)體成分。

2、體液中循環(huán)IC檢查

（1）抗原特異性方法 通過(guò)區(qū)別游離的抗原和與抗體結(jié)合的抗原，選擇性測(cè)定含有某種特定抗原的IC；在疑為由某種抗原引起免疫病理反應(yīng)的特定疾病時(shí)，可用此類(lèi)方法分析IC中的抗原成分。較為常用的方法是先用PEG沉淀檢品中IC，再與吸附特異性抗體的富含A蛋白的葡萄球菌（SAC）作協(xié)同凝集試驗(yàn)進(jìn)行抗原檢測(cè)。或用特異性抗體包被固相載體，吸附檢品中IC分子上的抗原，用ELISA法進(jìn)行測(cè)定，但應(yīng)同時(shí)設(shè)已知陽(yáng)性對(duì)照。