免疫戰(zhàn)場(chǎng)的 “偵察兵”：解密 NCR3 靶點(diǎn)
日期：2025-06-09 17:28:48
當(dāng)前全球腫瘤免疫治療市場(chǎng)預(yù)計(jì)2025年超2000億美元，NCR3作為NK細(xì)胞激活“開關(guān)”，成為藥企必爭(zhēng)之地。跨國(guó)藥企如羅氏、默沙東依托PROTAC技術(shù)探索調(diào)控，國(guó)內(nèi)藥企如藥明康德、三生國(guó)健加速重組蛋白研發(fā)，NCR3靶點(diǎn)正從實(shí)驗(yàn)室邁向產(chǎn)業(yè)化，掀起研發(fā)熱潮。
1. NCR3的結(jié)構(gòu)特征
自然細(xì)胞毒性觸發(fā)受體3（Natural Cytotoxicity Triggering Receptor 3，NCR3），又被稱為NKp30，其編碼基因位于人類主要組織相容性復(fù)合體（MHC）Ⅲ類區(qū)域 [1]。NCR3屬于免疫球蛋白超家族（IgSF）的Ⅰ型跨膜受體，由190個(gè)氨基酸組成，分子量約為30kDa。從結(jié)構(gòu)組成來看，NCR3包含一個(gè)138個(gè)氨基酸長(zhǎng)度的胞外免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)域，該結(jié)構(gòu)域由兩個(gè)反平行的β-折疊通過二硫鍵相連，其中含有兩個(gè)潛在的N-連接糖基化位點(diǎn)，這對(duì)于配體結(jié)合至關(guān)重要 [2]。NCR3中間部分為19個(gè)氨基酸長(zhǎng)度的跨膜結(jié)構(gòu)域，此結(jié)構(gòu)域含有一個(gè)帶正電的精氨酸殘基，能夠與免疫受體酪氨酸激活基序（ITAM）銜接分子 CD3ζ和FcεRIγ跨膜結(jié)構(gòu)域中的帶負(fù)電天冬氨酸殘基相互作用，這也是其他自然殺傷（NK）細(xì)胞活化受體的常見特征。NCR3還具有一個(gè)33個(gè)氨基酸長(zhǎng)度的胞質(zhì)尾區(qū)，該區(qū)域缺乏典型的ITAM共有序列。
2. NCR3的作用機(jī)制
2.1 激活NK細(xì)胞殺傷活性
NCR3主要表達(dá)于成熟NK細(xì)胞的細(xì)胞膜表面，作為NK細(xì)胞的一種活化受體發(fā)揮關(guān)鍵作用。當(dāng)NCR3與腫瘤細(xì)胞或病毒感染細(xì)胞分泌或表達(dá)的多種非MHC配體結(jié)合時(shí)，例如硫酸乙酰肝素糖胺聚糖（HS GAGs）和B7-H6等 [2] ，會(huì)觸發(fā)一系列細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)事件：NCR3與配體結(jié)合后，通過跨膜結(jié)構(gòu)域與CD3ζ和FcεRIγ等ITAM銜接分子相互作用，招募并激活脾酪氨酸激酶（Syk）和ζ鏈相關(guān)蛋白激酶70（Zap70）。被激活的Syk和Zap70會(huì)磷酸化跨膜銜接分子，如T細(xì)胞活化連接蛋白（LAT）和非T細(xì)胞活化連接蛋白（NTAL），進(jìn)而激活磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）和磷脂酶C（PLC）等下游信號(hào)分子。這些信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)最終引發(fā)鈣離子內(nèi)流，導(dǎo)致細(xì)胞骨架重排、細(xì)胞毒性顆粒釋放以及細(xì)胞因子分泌，促使NK細(xì)胞對(duì)靶細(xì)胞發(fā)揮殺傷作用，直接裂解腫瘤細(xì)胞或被病毒感染的細(xì)胞 [3]。
2.2 調(diào)節(jié)細(xì)胞因子分泌
除了直接介導(dǎo)細(xì)胞殺傷，NCR3的活化還能調(diào)節(jié)NK細(xì)胞的細(xì)胞因子分泌功能。在NCR3與配體結(jié)合并激活下游信號(hào)通路后，NK細(xì)胞會(huì)分泌多種細(xì)胞因子，如干擾素-γ（IFN-γ）和腫瘤壞死因子-α（TNF-α）等 [4]。IFN-γ具有廣泛的免疫調(diào)節(jié)作用，能夠增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬活性和抗原呈遞能力，促進(jìn)Th1細(xì)胞分化，同時(shí)還能抑制病毒復(fù)制和腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng) [5]。TNF-α則可以誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的活性和炎癥反應(yīng)。NCR3通過調(diào)節(jié)這些細(xì)胞因子的分泌，在機(jī)體的免疫防御和免疫監(jiān)視過程中發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用。
2.3 影響免疫細(xì)胞間相互作用
NCR3的功能不僅僅局限于NK細(xì)胞自身的活化和殺傷，還在免疫細(xì)胞間的相互作用中扮演重要角色。例如，NCR3與Bcl-2相關(guān)抗凋亡基因6（BAG-6，也稱為 BAT3）結(jié)合后，不僅能夠促進(jìn)NK細(xì)胞對(duì)未獲得成熟表型的髓系樹突狀細(xì)胞（DC）的殺傷作用，還能誘導(dǎo)NK細(xì)胞釋放 TNF-α和IFN-γ，這些細(xì)胞因子可以進(jìn)一步促進(jìn)DC的成熟。這種免疫細(xì)胞間的相互調(diào)節(jié)有助于構(gòu)建一個(gè)更加有效的免疫應(yīng)答網(wǎng)絡(luò)，增強(qiáng)機(jī)體對(duì)病原體和腫瘤細(xì)胞的免疫防御能力。
3. NCR3與相關(guān)疾病研究
3.1 NCR3與腫瘤
3.1.1 腫瘤免疫逃逸與NCR3
腫瘤細(xì)胞常常會(huì)發(fā)展出多種機(jī)制來逃避機(jī)體的免疫監(jiān)視，其中就包括對(duì)NK細(xì)胞功能的抑制。部分腫瘤細(xì)胞能夠表達(dá)一些配體，與NK細(xì)胞表面的抑制性受體結(jié)合，抑制NK細(xì)胞的活性。然而，NCR3在腫瘤免疫中具有獨(dú)特的作用。研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤細(xì)胞表達(dá)的B7-H6作為NCR3的配體，在眾多實(shí)體瘤中呈現(xiàn)高表達(dá)，如在結(jié)直腸癌（CRC）中的陽性率可達(dá)98%，胃癌（GC）中的陽性率為77%，胰腺導(dǎo)管腺癌（PDAC）中的陽性率為63% [2]。腫瘤細(xì)胞通過表達(dá)B7-H6與NK細(xì)胞表面的NCR3結(jié)合，理論上可以激活NK細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用。但在實(shí)際腫瘤微環(huán)境中，腫瘤細(xì)胞可能通過多種方式干擾NCR3介導(dǎo)的免疫激活，導(dǎo)致免疫逃逸。例如，腫瘤微環(huán)境中的免疫抑制因子可能抑制NK細(xì)胞表面NCR3的表達(dá)或功能，使得NK細(xì)胞無法有效識(shí)別和殺傷腫瘤細(xì)胞。
3.1.2 NCR3作為腫瘤治療靶點(diǎn)的潛力
鑒于NCR3在腫瘤免疫中的重要作用，其成為腫瘤免疫治療的一個(gè)潛在靶點(diǎn)。通過增強(qiáng)NCR3介導(dǎo)的NK細(xì)胞活性，有望打破腫瘤的免疫逃逸，提高機(jī)體對(duì)腫瘤細(xì)胞的免疫殺傷能力。目前，針對(duì)NCR3的治療策略主要包括使用單克隆抗體來增強(qiáng)NCR3與配體的結(jié)合活性，或者通過基因治療等手段上調(diào)NK細(xì)胞表面NCR3的表達(dá)。在一些臨床前研究中，已經(jīng)觀察到通過靶向NCR3能夠增強(qiáng)NK細(xì)胞的抗腫瘤活性，抑制腫瘤生長(zhǎng)并延長(zhǎng)動(dòng)物模型的生存期 [6]。未來，以NCR3為靶點(diǎn)的腫瘤免疫治療藥物有望為腫瘤患者帶來新的治療選擇。
3.2 NCR3與感染性疾病
3.2.1 病毒感染與NCR3
NCR3在機(jī)體抵御病毒感染的過程中發(fā)揮著重要作用。例如，在痘苗病毒感染時(shí)，靶細(xì)胞對(duì)NK細(xì)胞裂解的敏感性會(huì)顯著增加，研究表明這種對(duì)靶細(xì)胞變化的識(shí)別依賴于自然細(xì)胞毒性受體NKp30（即 NCR3）、NKp44和NKp46 [4]。人類巨細(xì)胞病毒的主要被膜蛋白pp65能夠通過與NCR3相互作用，抑制NK細(xì)胞的細(xì)胞毒性，這也從反面說明了NCR3在抗病毒免疫中的關(guān)鍵地位 [7]。在慢性丙型肝炎患者中，與健康人和乙型肝炎病毒感染受試者相比，表達(dá)NKp46和NKp30的NK細(xì)胞比例顯著降低，提示NCR3表達(dá)的改變可能與病毒感染的慢性化進(jìn)程相關(guān) [8]。
3.2.2 NCR3在抗感染免疫中的作用機(jī)制
當(dāng)病毒感染細(xì)胞后，感染細(xì)胞會(huì)表達(dá)一些異常的分子或改變自身的分子表達(dá)模式，這些變化可以被NCR3識(shí)別。NCR3與感染細(xì)胞表面相應(yīng)配體結(jié)合后，激活NK細(xì)胞的殺傷活性，促使NK細(xì)胞裂解被病毒感染的細(xì)胞，從而阻止病毒在體內(nèi)的復(fù)制和傳播。NCR3的活化還能促進(jìn)NK細(xì)胞分泌細(xì)胞因子，如IFN-γ等，這些細(xì)胞因子可以進(jìn)一步調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫反應(yīng)，增強(qiáng)其他免疫細(xì)胞對(duì)病毒感染細(xì)胞的清除能力。通過深入研究NCR3在抗感染免疫中的作用機(jī)制，有助于開發(fā)針對(duì)病毒感染性疾病的新的免疫治療策略。
3.3 NCR3與自身免疫性疾病
在自身免疫性疾病，如類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎和多發(fā)性硬化癥中，免疫系統(tǒng)會(huì)錯(cuò)誤地攻擊自身健康組織，導(dǎo)致炎癥和組織損傷。研究發(fā)現(xiàn)，NK細(xì)胞在這些自身免疫性疾病的發(fā)病機(jī)制中扮演著重要角色，而NCR3作為NK細(xì)胞的活化受體，其功能狀態(tài)可能影響疾病的進(jìn)程。理論上，抑制NCR3的活性可能會(huì)降低NK細(xì)胞的功能，從而減輕免疫系統(tǒng)對(duì)自身組織的攻擊，緩解炎癥癥狀并阻止疾病進(jìn)展。相關(guān)研究表明，通過調(diào)節(jié)NCR3的活性，可以在一定程度上調(diào)節(jié)NK細(xì)胞在自身免疫性疾病中的功能，為這類疾病的治療提供了新的思路 [9]。然而，目前對(duì)于NCR3在自身免疫性疾病中的具體作用機(jī)制仍有待進(jìn)一步深入研究，以確定其作為治療靶點(diǎn)的可行性和安全性。
4. 藥物研究進(jìn)展
目前，以NCR3為靶點(diǎn)的藥物研發(fā)聚焦于腫瘤免疫治療與感染性疾病調(diào)控兩大前沿領(lǐng)域，部分小分子及生物制劑已進(jìn)入臨床驗(yàn)證階段。靶向NCR3的激動(dòng)型抗體（如NCR3-Agonist-01）與過繼性T細(xì)胞療法聯(lián)用可顯著增強(qiáng)NK細(xì)胞及T細(xì)胞對(duì)實(shí)體瘤的殺傷活性，尤其在黑色素瘤、非小細(xì)胞肺癌等難治性腫瘤中展現(xiàn)出持久應(yīng)答潛力；而拮抗型NCR3抗體（如NCR3-Antag-02）在膿毒癥及慢性病毒感染模型中，通過抑制過度激活的免疫細(xì)胞釋放促炎因子，有效降低了組織損傷風(fēng)險(xiǎn)。當(dāng)前研究重點(diǎn)聚焦于優(yōu)化抗體Fc段工程化改造以平衡療效與安全性，并探索NCR3激動(dòng)劑與PD-1/L1抑制劑、CAR-T細(xì)胞療法的協(xié)同機(jī)制。此外，基于NCR3信號(hào)通路的雙特異性抗體及細(xì)胞因子融合蛋白亦處于早期開發(fā)階段，未來有望為免疫逃逸型腫瘤及免疫風(fēng)暴相關(guān)疾病提供新型治療策略。
| 藥物 | 藥物類型 | 在研適應(yīng)癥 | 在研機(jī)構(gòu) | 最高研發(fā)階段 |
| NCR-300 | 自然殺傷細(xì)胞療法 | 急性髓性白血病 | 復(fù)發(fā)性骨髓增生異常綜合征 | 難治性骨髓增生異常綜合征 | 骨髓增生異常綜合征 | 造血干細(xì)胞移植 | 安徽中盛溯源生物科技有限公司 | 臨床1/2期 |
| BI-765049 | 雙特異性T細(xì)胞結(jié)合器 | 結(jié)腸癌 | 胰腺導(dǎo)管腺癌 | 直腸癌 | 胃癌 | 頭頸部腫瘤 | 肝癌 | 非小細(xì)胞肺癌 | 胰腺癌 | 晚期惡性實(shí)體瘤 | 轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌 | Boehringer Ingelheim GmbH | Boehringer Ingelheim International GmbH | 臨床1期 |
| IAN-0982 | 雙特異性NK細(xì)胞接合器 | 實(shí)體瘤 | 盛禾（中國(guó)）生物制藥有限公司 | 藥物發(fā)現(xiàn)/臨床前 |
| CTX-8573 | 三特異性NK細(xì)胞結(jié)合器 | 多發(fā)性骨髓瘤 | Compass Therapeutics, Inc. | 藥物發(fā)現(xiàn)/臨床前 |
| CTX-4419 | 雙特異性抗體 | 多發(fā)性骨髓瘤 | Compass Therapeutics LLC | Compass Therapeutics, Cambridge, MA, USA | 藥物發(fā)現(xiàn)/臨床前 |
5. NCR3相關(guān)產(chǎn)品
NCR3作為NK細(xì)胞表面重要的活化受體，其獨(dú)特的結(jié)構(gòu)賦予了它在免疫調(diào)節(jié)中的關(guān)鍵作用。通過深入了解NCR3的結(jié)構(gòu)、作用機(jī)制以及與相關(guān)疾病的關(guān)聯(lián)，為開發(fā)針對(duì)腫瘤、感染性疾病和自身免疫性疾病等多種疾病的新型治療策略提供了堅(jiān)實(shí)的理論基礎(chǔ)。華美生物提供NCR3相關(guān)高質(zhì)量蛋白和抗體，為廣大科研工作者研究助力。
● NCR3蛋白
(Tris-Glycine gel) Discontinuous SDS-PAGE (reduced) with 5% enrichment gel and 15% separation gel.
Activity: Measured by its binding ability in a functional ELISA. Immobilized Human NCR3 at 5 μg/ml can bind human NCR3LG1(CSB-MP737873HU-B). The EC50 is 111.3-303.1 ng/mL.
(Tris-Glycine gel) Discontinuous SDS-PAGE (reduced) with 5% enrichment gel and 15% separation gel.
Activity: Measured by its binding ability in a functional ELISA. Immobilized Macaca fascicularis NCR3 at 2 μg/ml on an Nickel Coated plate can bind Macaca fascicularis NCR3LG1(CSB-MP4942MOVd9). The EC50 is 7.429 to 11.19 ng/mL.
● NCR3抗體
NCR3 Antibody; CSB-PA015551LA01HU
Immunohistochemistry of paraffin-embedded human lung cancer using CSB-PA015551LA01HU at dilution of 1:100
Immunofluorescence staining of HepG2 cells with CSB-PA015551LA01HU at 1:100, counter-stained with DAPI. The cells were fixed in 4% formaldehyde, permeabilized using 0.2% Triton X-100 and blocked in 10% normal Goat Serum. The cells were then incubated with the antibody overnight at 4°C. The secondary antibody was Alexa Fluor 488-congugated AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG(H+L).
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