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PROM1:一種新的腫瘤干細胞CSCs表面標志物,未來新分子靶點!

日期:2023-02-15 16:19:22

近期,Science Translational Medicine雜志發表的一篇題為“Intracavity generation of glioma stem cell-specific CAR macrophages primes locoregional immunity for postoperative glioblastoma therapy”研究引起高度的關注 [1]。該研究團隊開發了靶向CD133-GSC的嵌合抗原受體巨噬細胞(CAR-MΦ)免疫療法,用于清除腫瘤切除后殘留的CD133-GSCs。本項研究證實,在神經膠質瘤GBM小鼠模型中,靶向CD133-GSCs,可發揮抗腫瘤免疫作用,抑制GBM術后的復發率,并減少抗腫瘤藥物的毒副作用。

CD133又叫PROM1,越來越多的實驗證據支持PROM1可能是腫瘤(尤其是實體瘤)干細胞表面特異性表達的分子。目前為止,已有臨床研究將PROM1作為靶點或作為靶向性殺死腫瘤干細胞的分子靶點。因此,PROM1極有可能成為治療腫瘤的未來新分子靶點,為最終治療惡性腫瘤提供新的途徑!


1. 什么是PROM家族?

Prominin(PROM)家族有2個成員,Prominin-1和Prominin-2。Prominin來源于希臘語“prominere”突起,由于Prominin-1和Prominin-2均定位于細胞膜的突起,因而得名。Prominin-1主要在胰腺、肝臟、前列腺等上皮細胞和CSCs、膠質細胞等非上皮細胞表達,定位于細胞膜上表面突起。Prominin-2主要在腎小管等上皮細胞表達,定位于細胞膜的上表面和下表面的突起 [2-4]。目前,Prominin-1作為第一個被鑒定為“Prominin”的蛋白質,是一種新發現干細胞表面抗原標志,在腫瘤的診斷、治療和預防方面發揮著重要作用,成為PROM家族熱門的研究成員。


2. 什么是Prominin-1(PROM1)?

Prominin-1(PROM1,又名CD133)屬于五次跨膜糖蛋白Prominin家族的成員。人類的Prominin-1和Prominin-2基因分別定位于染色體4p15.32和2q11.1。PROM家族成員具有相同的空間結構,為五次跨膜的膽固醇結合糖蛋白,N端位于細胞外側,C端位于細胞內側,細胞內的2個環富含半胱氨酸,細胞外的2個環分別包含4個N連接的糖基化位點(圖1[5]。1997年Miraglia等人在CD34+人造血干細胞和祖細胞(hematopoietic stem and progenitor cells,HSPCs)的表面發現CD133/PROM1后,人們對PROM1的研究便不斷升溫。

PROM1起初的功能是作為造血祖細胞的特異性標志物,隨后科學家發現PROM1也可用于分離鑒定腫瘤干細胞(cancer stem cells,CSCs)。現有研究揭示,PROM1不僅能作為各種干細胞、CSCs以及腫瘤細胞的標記,還能介導PI3K/Akt、Akt、Src-FAK等信號通路,影響PROM1細胞的行為,其表達量與癌癥治療的效果也密切相關。因此,PROM1作為腫瘤治療靶點或預后的標志物,越來越受到重視![6]

PROM1蛋白結構示意圖

圖1. PROM1蛋白結構示意圖 [5]


3. PROM1相關的調控功能

目前對PROM1結構的分布及其他相關的研究推測PROM1具有以下功能:1)調節細胞增殖及分化;2)參與神經髓鞘形成;3)參與糖、鐵代謝調節和細胞骨架改變 [7-9]。除了生物學功能,PROM1作為干細胞、CSCs和腫瘤細胞的標志物,在分子調控上也發揮著重要作用,與腫瘤細胞的信號通路轉導相關,如p38MAPK及P13k/Akt途徑、NOTCH、Ras/MEK/ERK、mTOR等信號。

在神經膠質瘤中,PROM1蛋白的C端胞質結構域第828位酪氨酸殘基的磷酸化介導PROM1與p85之間的相互作用,通過激活PI3K/Akt信號通路,從而促進神經膠質瘤干細胞的致瘤能力。當敲低PROM1時則可有效抑制PI3K/Akt途徑的活性,降低神經膠質瘤干細胞的自我更新和致瘤性。此外,PROM1酪氨酸殘基的磷酸化能被PTPRK去除,PTPRK與PROM1羧基末端區域結合,催化PROM1的酪氨酸第828位和第852位去磷酸化,調節PROM1介導的Akt信號轉導 (圖2[10-11]。

PROM1相關的調控功能

圖2. PROM1相關的調控功能 [11]

同樣在膠質瘤中,研究發現PROM1細胞的自我更新可能與HEDGEHOG-GLI(HH-GLI)通路相關,并且其表達了干細胞特征基因,如OLIG2、BMI1BCAN、OCT.4、NANOGPTEN、ABCG2、PDGFR-A、SOX2和NRD1。此外,PROM1/CD133+細胞比PROM1/CD133-細胞表達更高水平的神經前體細胞標志物CD90、CD44、CXCR4、nestin等等;同樣,PROM1/CD133+細胞表達高水平的抗凋亡基因,如Bcl-2、Bcl-xL、FLIP、c-IAP2、XIAP、NAIP [12]。


4. PROM1在疾病中的作用

PROM1作為多種腫瘤共同的細胞表面標志物已成為研究熱點。腫瘤干細胞(CSCs)在腫瘤的耐藥、轉移復發過程中發揮關鍵作用。研究發現PROM1/CD133+細胞在卵巢癌、神經系統腫瘤、肺癌、胰腺癌、前列腺癌、黑色素瘤等多種腫瘤中具有CSCs特征 [13]。因此,PROM1有望在干細胞相關疾病的治療中發揮巨大作用。

4.1 PROM1和腫瘤干細胞相關疾病

在膠質瘤細胞系中,PROM1的高表達,可促進神經膠質瘤干細胞的自我更新和致瘤性。

另有研究提示,氧分壓水平可能影PROM1的表達,甚至PROM1基因的轉錄翻譯。在缺氧參與的PROM1表達調節中,缺氧誘導因子(hypoxia induced factor α,HIF-α)及SOX2起調節轉錄作用 [15]。另有實驗數據表明,在胃腫瘤細胞系中SOX17的表達與PROM1的表達相關,而前者是維持自我更新能力和干細胞特性的重要轉錄因子 [16]

在轉移性乳腺癌患者的腫瘤細胞中發現PROM1與EMT標志物之間具有密切關系,N-鈣粘蛋白與PROM1蛋白的表達呈正相關,揭示了在乳腺癌中腫瘤干細胞與上皮間質轉化的相關性 [17]。在肝癌細胞中,PROM1/CD133+細胞的體外增殖能力,在免疫缺陷小鼠體內的成瘤能力均明顯強于PROM1/CD133-細胞,且PROM1/CD133+細胞低表達成熟肝臟細胞 [18]

在人轉移性結腸癌標本中發現PROM1/CD133+及PROM1/CD133-細胞均能在體內外成瘤,但CD133+細胞表現出更強的侵襲性 [19]。在黑色素瘤中,CD133-和CD133+細胞均能成瘤,且均能分化使瘤體中CD133+/CD133-細胞比例與初始腫瘤相似 [20]。在卵巢癌中,CD133+細胞具有CSCs特征,且可通過CCL5介導的上皮間質轉化導致非CSCs轉移 [21]。

4.2 PROM1和其它疾病

早期臨床試驗表明,與CD34+細胞相比,PROM1/CD133+細胞可以改善移植的狀況。循環中PROM1/CD133+細胞,可用于干細胞治療肌肉萎縮癥 [22];移植PROM1+骨髓可以改善梗死心肌的功能 [23]。此外,PROM1與視網膜功能相關密切相關,研究發現PROM1基因中一個單核苷酸轉移突變會導致常染色體隱性視網膜變性疾病。敲除小鼠PROM1基因后表現出視網膜退化而失明 [24]。在人類內皮細胞系中的PROM1直接和血管內皮生長因子VEGF互相影響 [25]。PROM1的敲除還會導致腸道炎癥的發生,推測其在維持腸道的平衡過程中發揮重要的作用 [26]


5. PROM1的臨床在研藥物

目前已有多款針對PROM1的臨床藥物在研(表1),主要用于癌癥治療,如膠質母細胞瘤、卵巢上皮癌。其中靶向PROM1的ICT-121、COR-3、293C3-SDIE均為單克隆抗體免疫療法,暫未公布臨床數據。另外,隨著腫瘤干細胞理論的不斷進步完善,在探索治療腫瘤的過程中,CSCs已經成為最重要的靶點之一。如前所述,已有研究團隊開發出一種基于納米載體-水凝膠超結構系統的CAR-MΦ細胞療法,靶向CD133-GSCs,其在復發性膠質母細胞瘤的免疫治療方面取得了突破性進展。PROM1作為多種實體腫瘤干細胞表面的特異性標志物,其扮演的角色中也越來越被關注。相信未來在更多的PROM1抗體被研發出來以后,聯合各種現代分子實驗技術,PROM1的更多生物學功能也會被進一步闡明,從而為癌癥疾病提供新的治療方法。

藥物 靶點 作用機制 藥物類型 在研適應癥 在研機構 最高研發狀態
ICT-121 CD133;EEF2 CD133調節劑 樹突狀細胞疫苗 膠質母細胞瘤 Torrey Pines Institute For Molecular Studies, Inc.;Formatech, Inc.; 臨床1期
OXS-1650 CD133 蛋白質生物合成抑制劑;CD133抑制劑;EEF2抑制劑 ADC;單克隆抗體 實體瘤;卵巢上皮癌 University of Minnesota;University of Minnesota Masonic Cancer Center;GT Biopharma, Inc. 臨床1期
CNTY-103 CD133 自然殺傷細胞替代物;免疫細胞毒性;CD133調節劑 CAR-NK 膠質母細胞瘤 Century Therapeutics, Inc. 臨床前
COR-3 CD133;GPVI CD133調節劑;GPVI抑制劑 單克隆抗體 Acute Coronary Syndrome
急性冠狀動脈綜合征;Vascular restenosis
血管再狹窄;Cardiovascular Diseases
心血管疾病
advanceCOR GmbH 臨床前
293C3-SDIE CD133 CD133抑制劑 單克隆抗體;單鏈Fv片段抗體 / / 藥物發現
rAAV vector prominin-1 gene therapy (Technische Universitat Dresden) CD133 CD133抑制劑 腺相關病毒基因治療 / / 藥物發現

表1:PROM1的臨床在研藥物

為鼎力協助各藥企針對PROM1在腫瘤臨床中的研究,CUSABIO推出PROM1活性蛋白產品(Code: CSB-MP018751HU(A4)),助力您在PROM1機制方面的研究或其潛在臨床價值的探索。

Recombinant Human Prominin-1(PROM1)-VLPs (Active)

High Specifity Validated by SDS-PAGE

The high specifity was validated by SDS-PAGE. CSB-MP018751HU(A4) is detected by Mouse anti-6*His monoclonal antibody.

Excellent Bioactivity Validated by Functional ELISA

Immobilized PROM1 at 5 μg/mL can bind Anti-PROM1 recombinant antibody (CSB-RA018751MA1HU), the EC50 is 0.4322-0.7189 ng/mL.


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