新技術(shù)突破單分子測序限制
日期：2012-04-23 08:57:48
與以往將熒光標記核苷酸加入到DNA分子，進行直接檢測觀察不同，來自巴黎第七大學的丁方圓（Fangyuan Ding，音譯）等人研發(fā)出了一種能檢測DNA發(fā)夾分子長度變化的新技術(shù)。相關(guān)成果公布在Nature Methods雜志上。
上篇： Nature Methods：磁測序
一個概念上不同的方法就是納米孔測序，這種方法是讓單鏈DNA通過某種膜上的小孔，利用孔中變化的電流來讀取堿基序列信息。近期在基因組生物與技術(shù)大會（Genome Biology and Technology meeting）上，來自Oxford Nanopore的技術(shù)總監(jiān)Clive Brown報道了他們完成的兩個病毒基因組序列，這些序列具有單復合堿基讀長（single multikilobase reads）的特點。
然而盡管如此，納米孔測序技術(shù)仍然未得到證明，除非這些結(jié)果能夠發(fā)表，未來會告訴我們這一技術(shù)能走多遠。
那么最終限制磁測序技術(shù)發(fā)展的可能又有哪些呢？
同時進行監(jiān)測的磁珠數(shù)目決定了密度可能與目前擴增最好的測序儀相同（比如HiSeq 2000每平方毫米約75萬次），這受限于磁珠的大小，連接DNA模板的長度，以及光學分辨率限制。
成像速度受限于磁珠的機械運動，而這又由拉動力決定。有可能速度能達到每秒至少十微米（等同于游動細菌的速度），也就是說一秒鐘能完成十個開閉循環(huán)。而實際上發(fā)夾結(jié)構(gòu)熔合和退火動力學并不大可能受到限制，因此成像速度也許可以比每秒一張圖像更快。這似乎能滿足目前商業(yè)化“新一代”測序儀的要求，大大延長讀長。但是納米孔測序一旦成功，將難以匹敵——因為這種技術(shù)讀長能達到100kb，比目前最好的儀器通量更大。
然而即使這項成果提出了令人信服的證據(jù)，但這離實際操作，完全測序方法還遠。相反這一技術(shù)更多的也許是提出了許多可能性，比如精確定位將有助于提升單核苷酸差異檢測。這也開啟了合成測序的可能性。
另外一方面，這種技術(shù)也有可能利用快速操控磁場，進行實時監(jiān)控測序。這些前景都很誘人，因為它不需要重復循環(huán)的試劑，從而簡化了儀器設(shè)計。
毫無疑問，未來將會有更多研究人員探索這些，并進一步發(fā)展磁鑷測序方法。
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