ELISA試劑的臨床質量評價

日期：2011-08-24 08:46:54

ELISA試劑的評價（evaluation）分兩個方面：一是試劑本身的質量評價，符合一定要求后才能生產供應；一是在臨床應用中效果的評價。以肝炎ELISA診斷試劑為例，首先必須通過中國藥品生物制品檢定，以得到生產的許可。檢定內容除包裝、標簽、說明書等外，對試劑的性能，如特異性、靈敏度、精密度和線性等均需逐項檢定，通過對一系列參比品的檢測，結果符合要求者才為合格。ELISA試劑的臨床質量評價是用該試劑對臨床樣本進行檢測，以觀察其實際應用價值。部臨檢中心對乙肝ELISA診斷試劑在這方面進行了工作，通過質量評價，促進了試劑質量的提高。

一、診斷試劑臨床質量評價要點

從臨床應用角度考核檢驗試劑的可靠性，是以其能否區分健康與疾病的能力作為依據的。目前還很難找到100%可靠的試驗，任何試驗都會出現假陽性或假陰性。判斷試驗的可靠性常以其靈敏度及特異性作為考核標準。臨床應用的靈敏度用疾病患者試驗陽性的百分率表示，特異性以無病者試驗陰性的百分率表示。進行這種評價，首先需要收集有關的病人血清，然后用公認的檢測該項標志物最可靠的試劑進行測定，以確定其為陽性或陰性。

這一組表明測定物為陽性或陰性的血清組成"血清盤"（panel）。被評價的試劑測定此血清所得結果與血清盤標明的結果的關系如下表：

		血清盤結果		合計
		＋	－	合計
受檢試劑結果	＋	a	b	a+b
受檢試劑結果	－	c	d	c+d
合計		a+c	b+d	A+b+c+d

表中a為真陽性，b為假陽性，c為假陰性，d為真陰性。

被評價試劑的各項性能指標按以下分式計算：

靈敏度(%)=a/(a+c)×100%

特異性(%)=b/(b+d)×100%

符合率(%)=(a+d)/(a+b+c+d) ×100%

一般認為靈敏度或特異性>90%為良好。符合率是綜合靈敏度和特異性的指標。

二、臨床考核血清盤的制備要求

1、采用人的原血清；

2、血清盤應具有相應的穩定性；

3、血清盤中樣本不含防腐劑，或只含極微量的、不影響檢驗結果的防腐劑；

4、血清盤所包含的陰性樣本和陽性樣本約各占一半；

5、陽性樣本中，應有一定數量的強陽性和弱陽性樣本；

6、血清盤中應有一定數量的臨界值上、下含量的樣品，以檢驗試劑的靈敏度。

7、血清盤中應包含與該項檢驗相關的病種樣本和已積知具有干擾物質（RF因子）的樣本，以檢驗試劑的特異性。

三、臨床考核血清盤的建議

以抗-HBc-IgM為例，部臨檢中心收集近百例臨床肝炎病人的樣本，經美國abbott公司抗-HBc-IgM試劑反復檢驗篩選。選出血清70份，其中陽性29份，陰性41份，組成抗-HBc-IgM臨床考核血清盤。在70份樣本中，除7份為無病歷的質控血清外，抗-HBc-IgM陽性的22份樣本中含臨床診斷急性肝炎16例、慢性活動性肝炎5例、重癥肝炎1例；抗-HBc-IgM陰性的40份樣本中，含臨床診斷慢性遷延性肝炎24例、急性肝炎例（均為恢復期采的血樣）、慢性活動性肝炎8例（其中5例為恢復血樣）。