早期凋亡檢測的新工具
日期：2011-07-28 15:46:05
細胞膜的重排發生在凋亡的早期。在許多凋亡細胞中，這種重排導致磷脂酰絲氨酸（PS）從細胞膜的內側翻轉到細胞膜的表面，暴露在細胞外環境中。這一事件目前主要通過Annexin V來檢測。Annexin V是一種Ca 2+依賴的磷脂結合蛋白，在Ca 2+存在的情況下，與PS有很高的親和力，可與凋亡細胞膜上外翻的PS相結合。熒光（如GFP、FITC）標記的Annexin V一旦與凋亡細胞結合，就可以通過熒光顯微鏡觀察到。
IMGENEX開發的pSIVA（Annexin XII）也是一種基于Annexin的極性探針，可用于凋亡或其他形式細胞死亡的時空或激酶分析。pSIVA結合是可逆的，這樣研究人員就能夠檢測到瞬時的PS外翻，這與正常的生理過程以及可逆的凋亡事件相關聯。
pSIVA與一種靈敏的極性染料IANBD結合，只有當pSIVA與細胞膜結合時，才發出熒光。與不可逆的Annexin V結合相比，這種膜結合依賴的熒光以及可逆結合性質是技術上的一大進步，為凋亡通路和細胞存活帶來了更多信息。
pSIVA vs. Annexin V
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pSIVA-IANBD |
Annexin V-FITC |
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無毒性 |
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FACS |
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檢測早期凋亡 |
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活細胞成像 |
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活體成像 |
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高通量篩選 |
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無需洗滌 |
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活力評估√ |
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pSIVA-IANBD熒光信號的短暫出現伴隨著瞬時的PS外翻。當PS回到細胞膜內側，pSIVA-IANBD將被釋放到培養基中，熒光消失。至于瞬時的PS外翻，這被認為是正常的事件，不過仍有待進一步的研究。
pSIVA探針可應用于毒理學檢測、凋亡通路的高通量篩選、共聚焦顯微鏡、流式細胞儀以及凋亡的活體成像研究。
IMGENEX公司致力于開發和生產人體生理和疾病狀態的研究試劑、人類疾病的診斷試劑和治療試劑。這些新的試劑包括抗體、基因、蛋白表達系統、用于人類功能基因組研究的各種細胞和組織的陣列。涉及領域包括癌癥、凋亡、信號途徑、細胞衰老、代謝和感染等疾病。
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