多細(xì)胞因子檢測(cè)的新工具
日期：2011-05-12 08:20:04
Mosaic™ ELISA是R&D systems推出的一種96孔微孔板，其中每孔含有多達(dá)8種抗體，能同時(shí)檢測(cè)多種分析物。為計(jì)算樣品濃度，Mosaic ELISA試劑盒中還包含了純化的分析物標(biāo)準(zhǔn)品。
Mosaic ELISA也是采用了夾心法ELISA技術(shù)，但能同時(shí)檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清、血清或血漿樣品中的最多8種分析物。板中每個(gè)孔預(yù)先包被了多個(gè)捕獲抗體。將樣本加入孔中，目標(biāo)分析物與特異的捕獲抗體結(jié)合。隨后加入生物素檢測(cè)抗體，辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素以及化學(xué)發(fā)光底物試劑，以生成分析物特異的信號(hào)，此信號(hào)與單個(gè)捕獲抗體所結(jié)合的分析物數(shù)量成正比。平板可利用幾種常用的化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)來(lái)讀取。
目前，R&D systems推出了兩個(gè)試劑盒。Mosaic ELISA Human Cytokine Panel 1包含了特異識(shí)別CD40L、IFN-γ、IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-17和TNF-α的的抗體。Mosaic ELISA Human Growth Factor Panel 1則包含了bFGF、PDGF-BB、G-CSF、plGF、HGF和VEGF這六種生長(zhǎng)因子的抗體。
Mosaic ELISA將常規(guī)的雙位點(diǎn)夾心免疫法的特異性與多重分析物圖譜分析的高通量性能相結(jié)合，成為一種極佳的替代方法，而無(wú)需開(kāi)展多個(gè)傳統(tǒng)的ELISA實(shí)驗(yàn)。
Mosaic ELISA 試劑盒的特點(diǎn)：
• 96孔板形式
• 每孔最多8個(gè)分析物
• 320個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)
• 樣本體積小
• 分析時(shí)間4.5小時(shí)
利用Mosaic ELISA Human Cytokine Panel同時(shí)檢測(cè)多個(gè)分析物。按照規(guī)定次數(shù)用PHA處理人類外周血單核細(xì)胞（PBMC）。去除細(xì)胞培養(yǎng)上清等份，利用Mosaic ELISA Human Cytokine Panel 1同時(shí)定量8個(gè)不同的細(xì)胞因子水平。A. 孔示意圖顯示出可用Mosaic ELISA Human Cytokine Panel檢測(cè)的分析物點(diǎn)的位置。參考點(diǎn)（RS）提供了強(qiáng)的陽(yáng)性信號(hào)，可輕松觀察到孔的位置，并在數(shù)據(jù)分析中用于點(diǎn)比對(duì)。B. 標(biāo)準(zhǔn)曲線中每孔以及PHA處理的PBMC上清的代表性圖像。PBMC上清按1:64稀釋，確保所有分析物的值落在標(biāo)準(zhǔn)曲線內(nèi)。C. 通過(guò)分析每孔中IL-6點(diǎn)的平均點(diǎn)像素密度產(chǎn)生的IL-6直方數(shù)據(jù)圖（B中圈出的）。
