中科院藍(lán)柯課題組KSHV研究登國(guó)際著名學(xué)術(shù)雜志
日期：2011-01-27 12:44:38
在這項(xiàng)研究中藍(lán)柯課題組研究人員通過(guò)利用不同于之前的實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，驗(yàn)證了其他研究組報(bào)導(dǎo)的miR-K12-9能夠下調(diào)RTA的表達(dá)。該研究還報(bào)導(dǎo)了一個(gè)新的KSHV編碼miRNA能夠通過(guò)直接抑制裂解期主要調(diào)控基因RTA，并影響RTA對(duì)下游裂解期基因和病毒粒子復(fù)制來(lái)維持病毒潛伏感染狀態(tài)。
卡波濟(jì)肉瘤病毒是一種重要的人類(lèi)腫瘤病毒，它可以引起卡波濟(jì)肉瘤（KS）、原發(fā)性滲出性淋巴瘤（PEL）、多中心性卡斯特曼病（MCD）等數(shù)種惡性腫瘤。其中KS是AIDS患者中最常見(jiàn)的惡性腫瘤。KSHV屬于2型g-人類(lèi)皰疹病毒，其基因組有140~160Kb，編碼了多達(dá)90個(gè)以上的開(kāi)放閱讀框（ORF）和至少17個(gè)成熟的病毒miRNA。自從KSHV發(fā)現(xiàn)以來(lái)，潛伏-裂解周期調(diào)控就成為國(guó)際研究熱點(diǎn)。
博士研究生林先志等在藍(lán)柯研究員指導(dǎo)下，通過(guò)構(gòu)建含RTA3’UTR的報(bào)告基因，對(duì)所有KSHV編碼的pre-miRNA表達(dá)質(zhì)粒進(jìn)行篩選，發(fā)現(xiàn)KSHV編碼的多個(gè)miRNA能夠下調(diào)報(bào)告基因的表達(dá)。其中miR-K12-9和miR-K12-7對(duì)報(bào)告基因的下調(diào)在不同細(xì)胞系中重復(fù)驗(yàn)證。RTA3’UTR中miRNA靶位點(diǎn)突變實(shí)驗(yàn)和miRNA特異抑制劑揭示miR-K12-7對(duì)報(bào)告基因的下調(diào)作用是由其產(chǎn)生的miR-K12-7-5p來(lái)實(shí)現(xiàn)的。在KSHV陽(yáng)性細(xì)胞系中過(guò)表達(dá)miR-K12-7能夠下調(diào)RTA蛋白水平的表達(dá)，卻不能下調(diào)其mRNA水平，說(shuō)明miR-K12-7對(duì)RTA的抑制發(fā)生在翻譯水平上。進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)表明，miR-K12-7不僅能夠下調(diào)RTA的表達(dá)，還能下調(diào)RTA下游裂解期基因的表達(dá)，并對(duì)病毒粒子的產(chǎn)生有抑制作用。
該研究得到國(guó)家973計(jì)劃、國(guó)家自然科學(xué)基金、中國(guó)科學(xué)院“百人計(jì)劃”和上海浦江人才計(jì)劃科研開(kāi)發(fā)（A類(lèi)）的資助。
