避免細(xì)胞培養(yǎng)中污染的小技巧
日期：2010-08-17 14:05:37
細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)細(xì)胞工程，基因工程以及胚胎工程等生物工程研究非常重要。其在培養(yǎng)過(guò)程中非常容易污染，嚴(yán)重影響了實(shí)驗(yàn)的進(jìn)程。
方法改進(jìn)：為了減少細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程污染的概率，特做如下小小改進(jìn)： 為保證傳代培養(yǎng)的正常進(jìn)行不被污染，整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程都要求無(wú)菌意識(shí)，換液或傳代消化細(xì)胞時(shí)，培養(yǎng)皿蓋始終不能離開(kāi)培養(yǎng)皿，只要滿足操作即可。為避免或減少細(xì)胞污染幾率，放入培養(yǎng)箱預(yù)平衡的培養(yǎng)液至少有3瓶，同批次細(xì)胞盡量使用不同培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體，培養(yǎng)24 h后觀察以確保液體無(wú)污染。不同批次培養(yǎng)液最好交叉使用3-5 d，以防配制的新液體存在污染，并且新配制的培養(yǎng)液提前放入培養(yǎng)箱預(yù)平衡至少24 h，確認(rèn)無(wú)污染后再使用。細(xì)胞傳代培養(yǎng)過(guò)程中要定時(shí)在顯微鏡下觀察，一旦發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)皿內(nèi)液體渾濁或呈現(xiàn)黃色（主要是細(xì)菌污染）、有葡萄串狀黑色團(tuán)絮、樹枝狀，管狀或線團(tuán)狀物質(zhì)（主要是真菌污染）以及大量細(xì)胞碎片等表明細(xì)胞污染，應(yīng)及時(shí)采取措施處理或丟棄，以防污染其它正常細(xì)胞，造成交叉污染。另外，每次換液前均應(yīng)在燈光下輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)瓶，仔細(xì)觀察培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，如發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液渾濁或有絮狀漂浮物等均應(yīng)丟棄。
結(jié)果：經(jīng)過(guò)多次細(xì)胞培養(yǎng)，均可以獲得成功！并且本人培養(yǎng)的細(xì)胞已經(jīng)順利傳到60代以上，沒(méi)有見(jiàn)污染現(xiàn)象！
